Exp 5 Gel Electrophoresis of Protein
1. 原理:
請用一段文字簡述 SDS-PAGE 之原理及應用
2. 材料方法:
"Protein samples from 'salt-out', gel filtration, and ion exchange chromatography"
"12.5 % Separating Gel + 4 % Stacking Gel" 即可.
3. 結果: 掃瞄後的檔案 (bmp or jpg)
ps. 這次的電泳膠都跑得很漂亮, 大部份 lane 都很整齊, protein band 都清晰可辨, 非常成功!!! :) 希望討論部分好好的寫 ... 11/7/2006
(a) 請附電泳的結果圖, 上面應標示 Marker, 各個樣品為何?
(b) Marker (not maker) 共有 六種 protein, 第一個 phosphorylase B 可能比較淡.
p.s. Ovalbumin = ovum (egg) + albumin; not ox albumin
(c) 以 LogMr vs. relative mobility 作圖, 由關係式求各個樣品中蛋白質之分子量
4. 討論:
(a) 比較並説明電泳的結果和之前預測 (依據分子量, pI) 的結果, 是否相符.
(b) 依據你(妳)的電泳結果, 你(妳)認為那一種管柱層析的方法分離效果較好? 請說明理由.
5. 參考資料: (Don't copy into your report !!)
A. 蛋白質在不同 Acrylamide percentage (T%) gel 的電泳的結果:
T% too high --> exclusion of protein from the gel
T% too low --> decrease sieving
B. 雞蛋蛋清中的蛋白質組成 :
Table 1. Properties of major proteins in egg whites.
|
Egg White Protein |
% |
pI |
Formula Weight |
E% at 280 nm |
|
Ovalbumin |
54 |
4.5 |
46,000 |
7.50 |
|
Ovotransferrin |
12 |
6.1 |
76,600 |
11.60 |
|
Ovomucoid |
11 |
4.1 |
28,000 |
4.55 |
|
Lysozyme |
3.4 |
10.7 |
14,300 |
26.35 |
|
Ovoinhibitor |
1.5 |
5.1 |
49,000 |
7.4 |
|
Ovomacroglobulin |
0.5 |
4.5 |
900,000 |
? |
|
Ovoglycoprotein |
1.0 |
3.9 |
24,400 |
3.8 |
|
Avidin |
0.05 |
10.0 |
68,300 |
15.7 |